葡萄球菌是臨床較常見的感染菌，隨著大量頭孢菌素尤其是第三代頭孢菌素等高效廣譜抗菌藥物的廣泛使用，耐甲氧西林葡萄球菌（耐甲氧西林金黃色葡萄球菌）在全球范圍內(nèi)不斷增加，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）作為MRS和凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）家族中的一員.
簡介
葡萄球菌檢出率和多重耐藥性呈逐年增高趨勢，已成為醫(yī)院感染的主要病原菌之一。MRCNS為低毒力條件致病菌，感染后癥狀不典型，且呈現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象，給臨床診斷和治療帶來一定困難，高效的檢驗(yàn)方法已是必然需要。
生物學(xué)性狀
CNS的形態(tài)、排列和染色性與金黃色葡萄球菌相似，無鞭毛、莢膜和芽孢，不產(chǎn)生血漿凝固酶。表皮葡萄球菌產(chǎn)生白色色素，腐生葡萄球菌產(chǎn)生檸檬色色素，不分解甘露醇。CNS包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木葡萄球菌、溶血葡萄球菌、頭狀葡萄球菌、華納葡萄球菌、模仿葡萄球菌、木糖葡萄球菌和猿類葡萄球菌等30余種。其中，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌在CNS引起的感染中是較為常見的致病菌。
致病性
CNS的致病機(jī)制可能與其產(chǎn)生的細(xì)胞外黏質(zhì)(extracellular slime 實(shí)體,ESS)有關(guān)。黏質(zhì)由中性糖類化合物、糖醛酸和氨基酸組成
1、尿路感染
表皮葡萄球菌常引起青年女性泌尿道感染，僅次于大腸桿菌引起的泌尿道感染。
2、敗血癥
CNS引起的敗血癥，常見于新生兒。其引起的敗血癥居常見病原菌引起的第三位，僅次于大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌。
免疫性
手術(shù)和介入治療
骨和關(guān)節(jié)修補(bǔ)術(shù)、心瓣膜術(shù)、器官移植、動脈導(dǎo)管及心臟起搏器植入等均可造成CNS感染。
微生物學(xué)檢查
CNS根據(jù)血漿凝固酶、甘露醇及色素產(chǎn)生情況與金黃色葡萄球菌進(jìn)行區(qū)別，也可進(jìn)行細(xì)菌生化試驗(yàn)、質(zhì)粒圖譜、耐藥譜等聯(lián)合鑒定。
防治原則
必須采取相應(yīng)措施，加強(qiáng)醫(yī)院感染的監(jiān)控管理，加強(qiáng)對術(shù)前、術(shù)后、醫(yī)務(wù)人員、空氣和周圍環(huán)境的消毒，定期對臨床分離菌株的耐藥性進(jìn)行分析，制定抗感染方案以控制醫(yī)院感染。治療常用呋喃妥因、氧沙星和萬古霉素。
玻片法試管法
材料 菌株為實(shí)驗(yàn)室保存菌株，新鮮未稀釋的兔血漿（或人血漿），生理鹽水，金黃色葡萄球菌(ATCC25923)與表皮葡萄球菌(ATCC12228)質(zhì)控菌株。
玻片法：取未稀釋的新鮮兔血漿和生理鹽水各一滴分別滴于載玻片，取待檢菌菌落少許，分別混合，立即觀察結(jié)果，細(xì)菌聚集成團(tuán)塊或無法混勻?yàn)殛栃?，反之陰性，用于測定凝集因子；
試管法：取3支試管，各加0.5ml1：4稀釋的新鮮兔血漿，加1～3個(gè)菌落入1試管，充分研磨均勻，2、3試管加凝固酶陽性、陰性株作對照，置37℃水浴3～4h，觀察結(jié)果，細(xì)菌是試管內(nèi)血漿凝固呈膠凍狀為陽性，反之為陰性，用于測定游離型凝固酶。
方法評價(jià) 公認(rèn)采用兔血漿較好，許多實(shí)驗(yàn)室用病人血漿或血庫血漿來代替，因病人血漿中含有各種抗體、藥物，尤其某些病人血漿中纖維蛋白含量低下或受各種不同抗凝劑的影響甚至血漿被污染，故一定程度上影響了結(jié)果的準(zhǔn)確性。采用玻片法檢測凝聚因子，有10%～15%金黃色葡萄球菌呈假陰性，因此必須用試管法驗(yàn)證凝聚因子試驗(yàn)。
兩步法
血漿凝固酶陰性葡萄球菌兩步法
材料 堿性磷酸酶試劑盒為上海長征公司產(chǎn)品；糖、尿素、鳥氨酸脫羧酶生化試驗(yàn)管與新生霉素藥敏紙片、磷霉素藥敏紙片購自美國BD公司；厭氧硫乙醇酸鹽肉湯用Brewer配方，液面加凡士林，滅菌后換無菌橡皮塞。
方法 尿素、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)管接種細(xì)菌后用消毒液狀石蠟覆蓋；堿性磷酸酶試驗(yàn)。
方法評價(jià) 對第一步鑒定出現(xiàn)相似結(jié)果的菌株，可根據(jù)提示選用第二步鑒定程序以省時(shí)并減少消耗。不能用本法鑒定的科恩、木糖、松鼠、緩慢葡萄球菌在人體內(nèi)感染極為少見，必要時(shí)可用氧化酶、木糖、甘露醇等并參考有關(guān)資料進(jìn)行鑒定。兩步法低耗高效，有較高的實(shí)用價(jià)值。
參考資料 >