碘乙胺(Iodo乙酰胺)是一種基化試劑,常用于有機(jī)合成和蛋白組學(xué)。在蛋白組學(xué)中,碘乙酰胺可以保證蛋白質(zhì)樣品完全變性并保持還原狀態(tài),用于半胱氨酸和組氨酸的烷基化,防止重新形成二硫鍵。此外,碘乙酰胺也用于多肽測序、酶抑制劑等,是蛋白組學(xué)級(jí)試劑。在泛素研究中,碘乙酰胺也被用來抑制泛素酶(DUBs),因?yàn)樗梢耘cDUB活性位點(diǎn)的半胱氨酸殘基緊密結(jié)合。
理化性質(zhì)
白色至黃色結(jié)晶。熔點(diǎn)95℃。溶于熱水,易溶于乙醇,冷藏保存。
制備方法
由氯乙酰胺與碘化鈉反應(yīng)而得。將氯乙酰胺、無水丙、無水碘化鈉在浴上回流15h。冷至室溫,濾出氯化鈉,回收丙酮,稍冷后倒入硫酸氫鈉的冰水中,然后用硫酸鈉飽和溶液中和至pH6。冷卻結(jié)晶,過濾得粗品。粗品用水重結(jié)晶,即得成品。
主要用途
碘乙酰胺與半胱氨酸上的基(-SH)反應(yīng)迅速,一般在室溫下20min即可。因此以巰基(-SH)為活性基的酶,例如乙醇脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、3-磷酸甘油醛脫氫酶和像CoA那樣的作用與巰基(-SH)有關(guān)系的物質(zhì),可被碘乙酸特異地且不可逆地抑制。因此這一化合物對(duì)于發(fā)酵、糖酵解、肌肉收縮等也顯示強(qiáng)抑制作用
碘乙酰胺與組氨酸反應(yīng)較為緩慢,多用來移抑制核糖核酸酶(ribonuclease)的活性。
碘乙酰胺(ICH2CONH2),是和碘乙酸(CH2ICOOH)一樣,是通過下列反應(yīng)來不可逆地抑制SH酶類的。
R-SH+ICH2CONH2→R-S-CH2CONH2+HI
儲(chǔ)存及使用
碘乙酰胺見光易分解,應(yīng)儲(chǔ)存在褐色瓶中,并用錫箔紙裹住瓶身放于4℃冰箱中保存。碘乙酰胺做為蛋白質(zhì)烷基化試劑使用時(shí)一般不可配制儲(chǔ)存溶液,需現(xiàn)用現(xiàn)稱,反應(yīng)時(shí)容器亦應(yīng)用錫箔紙裹住。
參考資料 >