四甲基聯(lián)苯胺是一種物質(zhì)，化學(xué)式是C16H20N2。
簡介
特性
物理性質(zhì)
化學(xué)性質(zhì)
3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺（3，3’，5，5’-Tetramethylbenzidine）即TMB是一種脂溶性較強的基團，因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應(yīng)，且由于這種高度的脂溶性，使其易形成多聚體，在HRP活性部位產(chǎn)生粗大的、深蘭色沉淀物，這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的生色團。同時反應(yīng)產(chǎn)物的沉淀，使得HRP的活性部位更加暴露，利于酶氧化反應(yīng)進行。
應(yīng)用
TMB的反應(yīng)產(chǎn)物為深藍色，利于光鏡觀察，且反應(yīng)產(chǎn)物越聚越大，常超出單個細胞器的范圍（而DAB則被限制在其內(nèi)），故TMB反應(yīng)的檢測閾較低。
由于上述優(yōu)點，目前TMB常用于光鏡及超微結(jié)構(gòu)水平的HRP及HRP-WGA神經(jīng)投射的研究。需要注意的是：TMB顯色液中的A液和B液應(yīng)在2h內(nèi)新鮮配制。另外，TMB是一種較強的皮膚刺激劑，并有致癌的潛在可能，故使用時應(yīng)帶手套及在通風(fēng)條件下操作。
TMB經(jīng)HRP作用后共產(chǎn)主義物顯藍色，目視對比鮮明。TMB性質(zhì)較穩(wěn)定，可配成溶液試
劑，只需與過氧化氫溶液混和即成應(yīng)用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有無致癌性等
優(yōu)點，因此在ELISA中應(yīng)用日趨廣泛。酶反應(yīng)用HCL或硫酸終止后，TMB產(chǎn)物由藍色呈
黃色，可在比色計中定量，最適吸收波長為450nm。
ABTS雖不如OPD和TMB敏感，但空白值極低，也為一些試劑盒所采用
參考資料 >