散射光(scattering light)由于光子與物質分子相互碰撞，使光子的運動方向發生改變而向不同角度散射。散射光對熒光測定有干擾，必須采取措施消除。
散射光定義
散射光當一束平行單色光照射在液體樣品上時，大部分光線透過溶液，小部分由于光子和物質分子相碰撞，使光子的運動方向發生改變而向不同角度散射，這種光稱為散射光（scattering light） 。
分類及影響
光子和物質分子發生彈性碰撞時，不發生能量的交換，僅僅是光子運動方向發生改變，這種散射光叫做瑞利光（Rayleigh scattering light），其波長與入射光波長相同。
光子和物質分子發生非彈性碰撞時，在光子運動方向發生改變的同時，光子與物質分子發生能量的交換，光子把部分能量轉移給物質分子或從物質分子獲得部分能量，而發射出比入射光稍長或稍短的光，這種散射光叫做拉曼光（Raman scattering light）。
散射光對熒光測定有干擾，尤其是波長比入射光波長更長的拉曼光，因其波長與熒光波長接近，對熒光測定的干擾更大，必須采取措施消除。選擇適當的激發波長可消除拉曼光的干擾。
消除方法
瑞利光與入射光波長相同，主要是由溶劑，容器以及膠體散射形成，距離熒光峰較遠，只要選擇適當的波長，由單色器消除即可。
拉曼光發射波長與熒光波長相近，難區別，由空白溶劑產生。因為熒光波長不隨著激發光的改變而改變，而拉曼光會改變，所以，只要采用波長較短的激發光進行激發，就可以避免。
舉例說明
（1）以硫酸奎寧為例，從圖a可見，無論選擇320或350mn為激發光，熒光峰總是在448nm，將空白溶劑分別在320及350mn激發光照射下進行測定。從圖b可見，當激發光波長為320mn時，溶劑的拉曼光波長是360nm，對熒光測定無干擾；當激發光波長為350mn時，拉曼光波長是400nm，對熒光測定有干擾，因而應選擇320mn為激發波長。
（2）三氯甲烷五種常用溶劑在不同波長激發光照射下拉曼光的波長，可供選擇激發光波長或溶劑時參考。從表中可見，四氯化碳的拉曼光與激發光的波長極為相近，所以其拉曼光幾乎不干擾熒光測定。而水、乙醇及環己的拉曼光波長較長，使用時必須注意。
光線分類
攝影照明光線有直射光和散射光之分。直射光為硬光、散射光為軟光。散射光為發光面積較大的光源發出的光線。其典型的散射光是天空光。以及帶柔光玻璃的燈具，環境反射光也大多是散射光。如水面、墻面、地面等。散射光的特征是光線軟，受光面和背光面過渡柔合，沒有明顯的投影。因此對被攝對象的形體、輪廓、起伏表現不夠鮮明。這種光線柔和，宜減弱對象粗糙不平的質感，使其柔化。用于拍人物老的顯得年青些，年輕的顯得漂亮些。
光線的選擇，對勾畫被攝對象的形狀、體積、質地、輪廓等外部特征具有重要意義。在自然光照明條件下，有時只有散射光照明，只有單一的直射光照明是極少見的，大都是直射光和散射光混合光照明。
參考資料 >