臺盼藍,是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。
2017年10月27日,世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單初步整理參考,臺盼藍在2B類致癌物清單中。
基本性質(zhì)
中英文名稱:臺盼藍(Trypan 藍色)或稱臺盼蘭、錐蟲藍、曲利苯藍
分子式:CHNOSNa
分子量:960.82
可溶于水(10mg/ml)
是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。還常用于檢測細胞是否存活。
機理
正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內(nèi);而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經(jīng)死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。
臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù),就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。
臺盼藍染色只需3-5分鐘即可完成,并且操作非常簡單。
步驟
步驟:(來自supergama)
1、4%臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾,4度保存。使用時。用pbs稀釋至0.4%。(也可買Gibco的成品);
2、胰酶消化貼壁細胞,制備單細胞懸液,并作適當稀釋。
3、染色:細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液以9:1混合混勻。(終濃度0.04%)
4、計數(shù):在三分鐘內(nèi),分別計數(shù)活細胞和死細胞。
5、鏡下觀察,死細胞被染成明顯的藍色,而活細胞拒染呈無色透明狀。
6、統(tǒng)計細胞活力:活細胞率(%)=活細胞總數(shù)/(活細胞總數(shù)+死細胞總數(shù))×100%
其他
保存條件
室溫保存
說明
有潛在致癌危險
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
參考資料 >