DNS法，即3，5-二硝基水楊酸（3，5-dinitrosalicylic acid，DNS）比色法，是以比色法測還原糖的一種基本方法。還原糖的測定是糖含量測定的基本方法，測定方法有滴定法和比色法兩大類。DNS法測還原糖以其檢測濃度范圍較寬，方法簡便，便于還原糖大批量測定而得以普遍應用。
該法原理是在氫氧化鈉存在下（堿性條件），還原糖與DNS共熱后被氧化生成糖酸，DNS則被還原為氨基化合物（3-氨基-5-硝基水楊酸），在過量的堿性溶液中該化合物呈棕紅色，在540nm波長處有最大吸收峰。在一定的濃度范圍內，還原糖的量與吸光度值呈線性關系，故利用比色法可測定樣品中還原糖的含量。因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團的數量有關，而對還原糖的種類沒有選擇性，故DNS方法適合用在多糖（如纖維素、半纖維素和淀粉等）水解產生的多種還原糖體系中。
該測定法的實驗步驟為制作標準曲線、定糖等。
DNS
DNS因其顯色的深淺只與糖類游離出還原基團的數量有關，而對還原糖的種類沒有選擇性，故DNS方法適合用在多糖（如纖維素、半纖維素和淀粉等）水解產生的多種還原糖體系中。
試劑制備
將6.3克3,5-二硝基水楊酸和262ml 2mol/L氫氧化鈉，加到500ml含有182克酒石酸鉀鈉的熱水溶液中，再加上5克重苯酚和5克亞硫酸鈉，攪拌溶解，冷卻后加水定容到1000ml，即制成DNS試劑，貯于褐色瓶中放置一周后備用。
標準曲線
分別取葡萄糖標準液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于15 ml試管中，用蒸餾水補足至1.0ml, 分別準確加入DNS試劑2ml，沸水浴加熱2min，流水冷卻，用水補足到15ml刻度。在520nm波長下測定吸光度。
樣品測定
樣品液適當稀釋，使糖濃度為0.1-1.0mg/ml，取稀釋后的糖液1.0ml于15ml刻度試管中，加DNS試劑2.0ml，沸水煮沸2min，冷卻后用水補足到15ml刻度，在520nm波長下測定吸光度。從標準曲線查出葡萄糖mg/ml數。求出樣品中糖含量。
參考資料 >