倒置熒光顯微鏡是一種特殊的顯微鏡，其設計使得物鏡、聚光鏡和光源的位置相對于常規顯微鏡進行了反轉。這種顯微鏡通過熒光附件與倒置顯微鏡相結合，實現了對培養皿中活體樣本的顯微觀察和研究。它尤其適合于觀察未經染色的透明活體，如土壤微生物培養實驗中的樣本。
結構原理
構成
倒置熒光顯微鏡是由熒光附件與倒置顯微鏡結合而成的一種顯微鏡。倒置顯微鏡本身是為了適應生物學、醫學等領域中的組織培養、細胞離體培養、浮游生物、環境保護、食品檢驗等顯微觀察而設計的。為了實現對培養皿中活體樣本的直接顯微觀察，倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡工作距離較長，能夠直接對培養皿中的樣本進行觀察和研究。在這種基礎上，加入熒光附件，包括激光激發塊、熒光光源、熒光照明器和激發塊切換裝置，便形成了倒置熒光顯微鏡。
原理
倒置熒光顯微鏡具備高信噪比，能夠在捕捉極弱熒光的情況下獲取高品質的圖像。這一特點對于現代生命科學的研究尤為重要。奧林巴斯公司在UIS2系統中對物鏡進行了精密設計，使其能夠以較低的激發光強度捕獲明亮的熒光圖像，同時保持較高的光透過率和信噪比。此外，該公司還改進了熒光激發塊的干涉鍍膜技術，使得激發帶寬和熒光帶寬更加精確，從而進一步提升了信噪比。奧林巴斯的熒光激發塊采用硬鍍膜技術，不僅延長了使用壽命，還在潮濕環境中表現出更好的耐用性。針對特定熒光蛋白，如ECFP/EFP/EYFP/DsRed，BX2系列HQ型熒光激發塊能夠提供最佳的波長匹配，確保高銳化的鍍膜和高透過率，有效降低熒光衰減的風險。在抑制雜散光方面，奧林巴斯的熒光激發塊通過獨特的光吸收涂層，能夠吸收超過99%的雜散光，顯著減少了信號干擾。BX2系列還推出了新的PLAPON60XO物鏡，擁有目前普通觀察方法中最高的數值孔徑，適用于熒光成像，并支持紫外線激發，這是以往普通顯微鏡無法實現的。UPLSAPO100×O物鏡在340nm處依然保持著高透過率。
應用
倒置熒光顯微鏡廣泛應用于土壤微生物培養實驗，以及其他需要在培養瓶或培養皿內進行顯微觀察的領域。它可以觀察不經染色的透明活體，特別適用于對活體細胞和細胞離體培養等顯微觀察。
國內外品牌
國內外多家顯微鏡制造商生產有倒置熒光顯微鏡。其中，進口品牌的代表有奧林巴斯的IX71和CKX41型號，以及尼康株式會社的Ti系列。近年來，國內品牌也在不斷推出自己的倒置熒光顯微鏡產品，如mshot MF51，這款產品的熒光亮度高，成像清晰，已接近國際同類中檔顯微鏡的水平。
參考資料 >
倒置熒光顯微鏡.萊特.2024-10-27
倒置熒光顯微鏡應.知乎專欄.2024-10-27
倒置熒光顯微鏡的組成和功能用途.微儀光學.2024-10-27